产品货号:
ALH172
中文名称:
病毒DNA提取试剂盒
英文名称:
Viral genomic DNA rapid extraction kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本试剂盒采用特异性结合病毒DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,病毒DNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA。本试剂盒可以满足绝大多数的病毒DNA的提取要求,如病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨细胞病毒)等等。
病毒裂解后,DNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR、酶切、杂交等分析。
- 不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
- 节省时间,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
- 多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA纯度高,质量稳定可靠。
组分 | 规格 |
裂解液DLB | 20mL |
去蛋白液RE | 25mL |
漂洗液WB | 15mL |
洗脱缓冲液EB | 15mL |
吸附柱AC | 50个 |
收集管(2mL) | 50个 |
保存:室温,有效期1年。
各溶液使用后应及时盖紧盖子。
第一次使用前请先在15mL漂洗液WB中加入60mL无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
- 200μL血清等体液(需回复到室温,不足可用0.9% NaCl或者PBS补足)转入上述1.5mL离心管,加入400μL裂解液DLB,立刻涡旋振荡充分混匀。
- 室温(15~25℃)放置10分钟,每隔5分钟,振荡混匀一次。
- 加入450μL无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀。
- 如果周围环境高于25℃,乙醇需要冰上预冷后再加入。
- 将上述混合物加入一个吸附柱AC中,(吸附柱放入收集管中)13000rpm离心30~60秒,倒掉收集管中的废液。
如- 果总体积超过750μL,可分两次将溶液加入同一个吸附柱AC中。
- 加500μL去蛋白液RE,12000rpm离心30秒,弃废液。
- 加入500μL漂洗液WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12000rpm离心30秒,弃废液,加入500μL漂洗液WB,重复一遍。
- 将吸附柱AC放回空收集管中,13000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
- 取出吸附柱AC,放入一个新的离心管中,在吸附膜的中间部位加30~50μL洗脱缓冲液EB(事先在65~70℃水浴中加热效果更好),室温放置1分钟,12000rpm离心1分钟。如果想得到较多量的DNA,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,12000rpm离心1分钟。
- 洗脱体积越大,洗脱效率越高。如果需要DNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积,但是最小体积不应少于20μL,体积过小降低洗脱效率,减少DNA产量。
- DNA可以存放在2~8℃,如果要较长时间存放,可以放置在-20℃。
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